2.1.4.3.MATERIALES INERTES Y GELIFICANTES

2.1.4.3.MATERIALES INERTES Y GELIFICANTES

Agentes solidificantes

Su agregado al medio de cultivo es opcional.

El más usado:

-        El agar, es un  polisacárido ácido derivado de algas marinas, formado principalmente por galactosa con un grupo sulfato cada 10 a 50 restos. Suele contener sustancias nutritivas en pequeñas concentraciones, y por esto no puede ser utilizado en medios de composición química estrictamente definida destinados a autotrofos. Se usa sin problemas en medios de cultivo complejos para quimioorganotrofos.  Se agrega al 1.5-2% en medios de consistencia sólida normal, al 0.2-0.3% en medios semisólidos o blandos, al 5% en medios de consistencia muy firme para detener el crecimiento de gérmenes muy móviles, y al 0% cuando se preparan medios líquidos (caldos).

Sus características:

-         Funde a 80-100°C y permanece líquido hasta 50-55°C.

-       A 45-55°C se pueden agregar suspensiones de células sin afectar la viabilidad (supervivencia) de las mismas.

-      Permanece sólido a 37°C, temperatura de incubación de la mayoría de las bacterias patógenas del hombre.

-            No es tóxico para las bacterias, ni es degradado por éstas.

-          Utilizado al 1.5-2%, permite el aislamiento de colonias (poblaciones de microorganismos derivadas de una única célula), lo que resulta imposible en medios líquidos!

-            Es transparente, lo que facilita la visualización de las colonias.

-         Al solidificar, forma una trama suficientemente abierta para permitir la difusión de los nutrientes del medio de cultivo en todas direcciones, y suficientemente cerrada –según la concentración empleada- para impedir la movilidad de los microorganismos.

Otros solidificantes:

-            Agarosa: es agar muy transparente libre de sulfatos. Se usa intensamente para fines específicos en Inmunología y Biología Molecular.

-            Silicagel: es silicato diluido en HCl. Se emplea en medios de cultivo para autotrofos, cuando debe excluirse materia orgánica del medio de cultivo.

-            Gelatina: es una proteína obtenida por hidrólisis del colágeno. Fue el primer solidificante usado en Microbiología, pero es degradado por la mayoría de las bacterias (lo comen, por lo que el medio inicialmente sólido termina convertido en medio líquido) y la temperatura de incubación no puede ser mayor a 22°C (es el punto de fusión) con lo que cultivos sólidos a temperaturas más altas resultan inviables.

-            Albúmina de huevo, suero: a 80°C estas proteínas coagulan y solidifican el medio de cultivo.

http://www.google.com.mx/url?sa=t&rct=j&q=componentes%20del%20medio%20de%20cultivo&source=web&cd=2&cad=rja&ved=0CCUQFjAB&url=http%3A%2F%2Fbd.unsl.edu.ar%2Fdownload.php%3Fid%3D281&ei=QCN6UMXlOIS1rQGVv4HwAg&usg=AFQjCNFw3VnvYBfME7A9QOw_yAsOQ7SFiA

El gelificante suele ser un sólido que al añadirse a un medio de cultivo se disuelve por calentamiento fuerte (cercano a los 100 ºC) y hace que el medio adquiera la consistencia de gel al enfriarse a temperaturas menores. Uno de los mejores agentes gelificantes de que se dispone para realizar cultivos in vitro de tejidos vegetales es el agar, también conocido como agar-agar. Los gelificantes deben cumplir con una serie de requisitos: no ser asimilado por el explanto, lo que haría que al consumirse el medio retornase a su estadio líquido, no interferir en la absorción de los nutrientes del medio de cultivo, y permanecer estable durante el tiempo de cultivo.

El agar es un polisacárido natural no ramificado y de alto peso molecular (3.000 a 160.000), extraído de algas rojas, Rhodofíceas, principalmente del género Gelidium. Está formado por galactosidos que forman la Agarosa, y de un polisacárido sulfatado, la Agaropectina. Además, contiene muy pequeñas cantidades de cationes como impurezas (Na, K, Ca, Mg, etc.). Su composición varía ligeramente en función de la especie de que se extrae, su procedencia, época de cosecha, madurez del alga, etc. Los procesos de obtención y purificación para producir los distintos tipos de agar afectan principalmente a su contenido en impurezas.

La principal característica que hace del agar un gelificante es su total disolución en agua al ser calentado a 85-100 ºC, y su gelificación alrededor de los 35 ºC. Es termoreversible, es decir, se puede volver a disolver y a gelificar repetidas veces mediante variaciones en la temperatura, y es autoclavable. Su gelificación depende del pH del medio de cultivo, siendo óptima para pH 5.4-5.7. Los medios de cultivo para tejidos vegetales suelen ajustarse a pH = 5.7 antes de añadir el agar, por lo que melifican bien; tras la gelificación el agar absorbe una cantidad de agua de hasta 200-300 veces su peso, y forma un gel muy translúcido. La preparación de los medios de cultivo para vegetales incluye generalmente un aporte de agar del 0.8%.

Entre los compuestos alternativos al agar para utilizarse como gelificantes en el cultivo in vitro de tejidos vegetales tenemos:

• Alginatos. Excelentes para cultivo de células en suspensión y de protoplastos.

• Agarosa. Es uno de los polímeros del agar, obteniéndose a partir de él. Se utiliza más en electroforesis de proteínas o ácidos nucleicos que en cultivo in vitro.

• Fitagel. Conocido también con el nombre gelrita, marca registrada de Merck; es de amplio uso.

• Ficoll. Es un derivado de polisacáridos que produce medios de cultivo de tipo coloidal. Encuentra una aplicación importante en el cultivo de anteras.

El fitagel es un polisacárido aniónico obtenido por fermentación bacteriana. El gel que forma se caracteriza principalmente por:

• Gran transparencia, que facilita el seguimiento del cultivo.

• El medio nutritivo se gelifica con un aporte de fitagel de tan sólo el 0.2%

• Precisa de cationes divalentes para su gelificación, principalmente Mg o el Ca.

• Se disuelve y gelifica en respuestas a cambios de temperaturas, como el agar, si bien no es termoreversible.

• Los explantos cultivados en medios con fitalgel absorben los nutrientes con mucha facilidad, lo que permite un crecimiento mas rápido, sin embargo la velocidad de absorción puede ser excesiva, no pudiendo incorporarse a sus estructuras y compuestos sino que quedarían en solución dentro del explanto, causando el problema conocido típicamente como hiperhidricidad, frecuente en cultivos de tipo leñoso.

•Su coste es mucho menor.

2.1.4.2. COMPUESTOS ORGANICOS

2.1.4.2. COMPUESTOS ORGANICOS

Factores de crecimiento

Son compuestos orgánicos específicos requeridos en muy bajas concentraciones que no pueden ser sintetizados por la célula que los necesita. Por esta razón, deben ser agregados al medio de cultivo. Ej.: principalmente vitaminas del grupo B, algunos aminoácidos, purinas, pirimidinas, ácidos grasos. Hay ejemplos clásicos como los factores X y V (porfirinas) de la sangre requeridos por la bacteria Haemophilus influenzae para crecer. El suero fetal bovino, que aporta numerosos factores de crecimiento, es imprescindible para el cultivo de células animales.

Cómo surge la necesidad de un factor de crecimiento? La capacidad de sintetizar un compuesto esencial está relacionada con una secuencia de reacciones catalizadas por enzimas que se completa satisfactoriamente. Cuando por alteraciones genéticas, alguna enzima de la secuencia no puede ser sintetizada, la serie de reacciones se bloquea en algún paso y no finaliza con éxito. El compuesto que por esta razón dejó de sintetizarse, se convierte en un factor de crecimiento.

** En ciertos medios de cultivo para quimioorganotrofos, los factores de crecimiento pueden ser aportados por diversos extractos:

-Extracto de carne: su función es ser complemento vitamínico de las peptonas. Pero también aporta sustancias nitrogenadas como:  aminoácidos, bases púricas y pirimídicas, ácidos orgánicos, creatina, xantina, hipoxantina, ácido úrico, urea, y sustancias no nitrogenadas como glucógeno, fosfatos de hexosas, ácido láctico, sales inorgánicas.

La calidad de este tipo de extracto varía con la carne empleada, el tiempo y la temperatura de extracción.

-Extracto de levadura: se obtiene por autolisis o plasmolisis de las células de levadura. Su función es sersuplemento vitamínico de las peptonas, pero también aporta mezclas de aminoácidos y péptidos, y carbohidratos.

-Extracto de malta: es un interesante sustituto del extracto de levadura ya que posee adecuado contenido de vitaminas, carbohidratos y aminoácidos. Es el extracto soluble en agua de la malta de cebada.

2.1.4.1. COMPUESTOS INORGANICOS

2.1.4.1. COMPUESTOS INORGANICOS

Elementos energéticos y constitutivos:

a) Macroelementos (g/l):

• Fuente de carbono: puede ser CO₂ ó compuestos carbonados orgánicos. Se utilizan en la construcción de innumerables moléculas necesarias para la célula. Los hidratos de carbono se consideran fuente de carbono y energía por excelencia en los quimioorganotrofos. Los más comunes son:

-         hexosas como glucosa, fructosa, galactosa;

-         pentosas como arabinosa, xilosa, ramnosa;

-         disacáridos como lactosa, sacarosa, maltosa;

-         trisacáridos como rafinosa;

-         polisacáridos como almidón, glucógeno;

-         alcoholes como glicerol, sorbitol, manitol; y

-         glucósidos como salicina, y esculina.

• Fuente de nitrógeno: muchos organismos son autotrofos respecto de la fuente de nitrógeno y pueden crecer utilizando moléculas sencillas como NO₃^-, NH₃ ó N₂. El nitrógeno es metabolizado para proveer proteínas, ácidos nucleicos y polímeros de pared. Otros microorganismos pueden incorporar nitrógeno en forma de aminoácidos, bases púricas o pirimídicas.

** En ciertos medios de cultivo para quimioorganotrofos, el aporte de nitrógeno es realizado por las peptonas, que son los productos de la hidrólisis ácida o enzimática de proteínas de origen animal o vegetal (carne, soja, caseína, gelatina, harina de maíz y girasol). Esos productos de hidrólisis pueden tener longitud variable, desde aminoácidos, hasta dipéptidos, tripéptidos, polipéptidos, albumosas, proteosas.

La hidrólisis ácida puede ser realizada con HCl ó H₂SO₄ y presenta las siguientes desventajas:

-            el triptofano se destruye

-            se pierde el 10% de vitaminas presentes

-            desaparecen casi completamente los polipéptidos

Se prefiere la hidrólisis enzimática que emplea diferentes proteasas actuando a pH específicos, ej. papaína a pH 6.5, tripsina a pH 8.5, pepsina a pH 2.

Las peptonas son fuente de nitrógeno y, en ausencia de hidratos de carbono en el medio de cultivo complejo, cumplen la función de fuente de carbono y energía. Aportan vitaminas del grupo B, trazas de metales y fosfatos que dan carácter “buffer” al medio.

Las peptonas de origen vegetal pueden aportar carbohidratos fermentables.

• Fuente de fósforo: se suelen agregar fosfatos de sodio o potasio que también confieren poder buffer al medio de cultivo (pH cercano a 7). Si se agrega yema de huevo al medio de cultivo, el aporte de P es realizado por los glicerofosfolípidos de la yema. El fósforo se incorpora a ácidos nucleicos, fosfolípidos, polímeros de membrana, ATP, y sustancias de reserva (gránulos de volutina)
• Fuente de azufre: se adiciona como SO₄⁼, cisterna o metionina. En la célula se incorpora a aminoácidos y diferentes coenzimas.
• Fuente de calcio, magnesio y potasio: potasio, calcio y magnesio se adicionan como sales inorgánicas. Son cationes que estabilizan macromoléculas aniónicas. K⁺ actúa como coenzima y estabilizador de RNA. Mg²⁺se integra a colorofila en organismos fotosintéticos. Ca²⁺ abunda en esporas como dipicolinato de calcio.
• Fuente de sodio: sodio contribuiría a equilibrar la presión osmótica del medio extracelular. Es un catión requerido por bacterias halofílicas. Se suele suministrar como NaCl.

   

      b) Microelementos o trazas (mg ó ug/ml): suelen estar naturalmente presentes como contaminantes de los macroelementos.

       *  Frecuentemente esenciales:

          Mn: estimula el crecimiento, favorece la esporulación.

          Fe: cofactor de enzimas para la función respiratoria en citocromos, catalasa y flavoproteínas. En adecuada concentración favorece la síntesis de toxina diftérica.

          Co: interviene en la síntesis de vitamina B₁₂.

          Cu: presente en oxidasa terminal de la cadena respiratoria.

• Esenciales en casos especiales: B, Al, Si, V, As, Se, Mo, Sn, Be, F, etc.
• Inhibidores del crecimiento: Au, Ag, Cd, Cr, Pb, y cualquier microelemento a concentración mayor que 10^{-4 Mpuede resultar tóxico para el desarrollo de los microorganismos.}  

2.1.4. COMPONENTES DEL MEDIO DE CULTIVO

2.1.4. COMPONENTES DEL MEDIO DE CULTIVO

Como ya se ha señalado, la provisión de elementos nutritivos en concentración adecuada, depende del conocimiento que se tenga de las condiciones del desarrollo en el hábitat natural.

La cantidad de sales y agua que se agregue a un medio de cultivo, se relaciona directamente con el pH, la fluidez y la presión osmótica que se le quiera brindar a los microorganismos. En función de la consistencia se puede clasificar a los medio el líquidos y sólidos. En el laboratorio, los medios de cultivo pueden presentarse en forma líquida, en cuyo caso se los denomina caldos, o en forma sólida si se le agrega agar al caldo. En cuanto a la esterilización, este procedimiento garantiza la destrucción de todos los microorganismos no deseados que se encuentran presentes durante la preparación del medio de cultivo. Si los componentes del medio son estables al calor se los lleva al autoclave (121 ºC, 15 minutos). Si se requiere sangre u otros componentes inestables, como antibióticos y compuestos fácilmente oxidables al calor, se los esteriliza por separado por otros procedimientos y se lo agrega al medio que ha sido esterilizado cuando se haya enfriado a 50 ºC. 

En cuanto a los inhibidores, cabe aclarar que un compuesto puede actuar como inhibidor para algunos microorganismos y no para otros.

CONSTITUYENTES HABITUALES DE LOS MEDIOS DE CULTIVO

Los elementos citados a continuación, son los más frecuentemente usados en la preparación delos medios de cultivo, aunque pueden no ser los únicos e incluso alguno de ellos puede estar ausente de la preparación.

• −      Agua destilada o desionizada:  Libre de inhibidores del crecimiento.
• −  Agar: . El agar se utiliza como agente gelificante para dar solidez a los medios de cultivo. Elcomponente dominante en el agar es un polisacárido, al que acompañan algunas impurezas yque se obtiene de ciertas algas marinas. Existe en rama o en polvo, se solubiliza en agua aebullición (funde hacia los 98°C) y al enfriarse forma un gel inodoro e insípido (se gelificaalrededor de los 42°C), dependiendo de su grado de pureza, por lo que tiene la ventaja de sersólido a la temperatura de incubación. Con la excepción de algunos microorganismosmarinos, el agar no es empleado como nutriente. Para preparar un medio sólido se le agregaagar al 12-18 %. Si se desea visualizar movilidad se usa agar blando se le agrega agar al 3 %.
• -        Extractos:  Para su preparación, ciertos órganos o tejidos animales o vegetales (por ejemplocarne, hígado, semillas, etc.) son extraídos con agua y calor, y posteriormente concentradohasta la forma final de pasta o polvo. Estos preparados deshidratados son frecuentementeempleados en la confección de medios de cultivo. Ejemplos: extracto de carne, de levadura,de malta, etc. En el caso del extracto de carne en polvo o pasta, provee sustanciasnitrogenadas, minerales y vitaminas, mientras que el extracto de levaduras provee vitaminasdel grupo B, nitógeno y carbono.
• -     Peptonas: . Son mezclas complejas de compuestos orgánicos nitrogenados y sales mineralesque carecen de identidad química definida; se obtienen por digestión enzimática o química deproteínas animales o vegetales (soja, carne, gelatina, caseína, etc.). Las peptonas son muyricas en péptidos y aminoácidos, pero pueden ser deficientes en determinadas vitaminas ysales. Proveen proteosas, peptonas, polipéptidos y aminoácidos.
• -  Fluidos Corporales: . Sangre completa, sangre desfibrinada, plasma o suero sanguíneo sonfrecuentemente añadidos a los medios empleados para el cultivo de algunos patógenos. Lasangre no puede ser esterilizada y debe, por tanto, ser obtenida en condiciones asépticasdirectamente de un animal sano. Los fluidos corporales no solamente contribuyen confactores de crecimiento, sino también con sustancias que neutralizan inhibidores delcrecimiento de algunas bacterias.
• -  Sistemas amortiguadores: . Algunos componentes son incorporados al medio de cultivo paramantener el pH dentro del rango óptimo del crecimiento bacteriano. Los microorganismosmás comunes son neutrófilos (el pH óptimo para su crecimiento está próximo a laneutralidad), y sales como fosfatos bisódicos o bipotásicos, o sustancias como las peptonas,previenen una desviación del pH.
• -        Indicadores de pH: Indicadores ácido- base se añaden a menudo a los medios de cultivo conobjeto de detectar variaciones del pH.
• -        Agentes reductores:  Cisteína, tioglicolato y otros son agentes reductores que se añaden a losmedios de cultivo para crear condiciones que permitan el desarrollo de los gérmenesmicroaerófilos o anaerobios.
• -     Agentes selectivos: La adición de determindas sustancias al medio de cultivo puedeconvertirlo en selectivo (ver más adelante, clasificación de los medios de cultivo). Porejemplo, cristal violeta, sales biliares, azida sódica, telurito potásico, antibióticos, etc., a laconcentración adecuada, actúan como agentes selectivos frente a determinadosmicroorganismos.

COMPONENTES DE UN MEDIO DE CULTIVO SON:

• Auxinas: ácido indol-acético (IAA), ácido naftalen-acético (NAA), ácido indol-butirico (IBA), ácido 2,4-Dicloro-fenoxi-acético (2,4-D)

• Citoquininas: benciladenina (BA), quinetina (KIN)

• Giberelinas: ácido giberélico (GA3)

• Ácido abscísico (ABA)

• Otros reguladores del desarrollo vegetal

De entre ellos es frecuente la adición de auxinas y citoquininas, en diferentes proporciones en función principalmente del tipo de diferenciación a inducir y del tipo de especie a cultivar. El uso de otros reguladores es mucho más ocasional.

Hidratos de Carbono:

• Monosacáridos: glucosa, fructosa, galactosa, manosa, arabinosa, ribosa, xilosa

• Disacáridos: sacarosa, maltosa, celobiosa, trehalosa, lactosa

• Trisacáridos: rafinosa

• Polisacáridos: almidón, celulosa De entre ellos el habitualmente utilizado en los medios de cultivo es la sacarosa.

Otros compuestos orgánicos:

• Aminoácidos

• Poliaminas Su utilización es diversa: para aportar una fuente suplementaria de nitrógeno en forma amina, producir procesos morfogénicos, etc. Suplementos de composición indefinida:

• Extractos de levadura, malta, carne, vegetales (patata, maíz, raíces y rizomas)

• Jugos de frutas u hortalizas (naranja, banano, piña, tomate, patata, leche de coco)

• Caseína hidrolizada Su uso es desaconsejable por no poder darse una composición precisa del extracto añadido, pueden resultar útiles sólo en casos concretos.

Compuestos específicos:

• Antioxidantes: ácido cítrico, ácido ascórbico

• Adsorbentes: carbón activo

• Controladores del potencial osmótico: polietilen-glicol, manitol Se puede precisar su aporte a los medios en condiciones concretas.

2.1.3.2. TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVOS

2.1.3.2. TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVOS

Se clasifica:

Según su naturaleza:

_ Líquido

_ Sólido

_ Semisólido

Según su composición:

_ Medio definido-sintético

_ Medio indefinido-complejo

Según su uso:

_ Medio mínimo

_ Medio enriquecido

_ Medio selectivo

_ Medio diferencial

2.1.3.1. DEFINICIÓN DE MEDIO DE CULTIVO

2.1.3.1. DEFINICIÓN DE MEDIO DE CULTIVO

1.- Solución acuosa con las sustancias necesarias para que las células generen energía y realicen biosíntesis

Requerimientos nutricionales componentes del medio de cultivo:

_ Fuente de energía

_ Fuente de C, N, H, O

_ Fuente de P, S, Ca, K

_ Micronutrientes

_ Factores de crecimiento

http://www.fagro.edu.uy/~microbiologia/docencia/materiales%20teoricos/Medios%20de%20cultivo%20y%20esterilizacion.pdf

2.- Los medios de cultivo son mezclas de substancias nutritivas que se combinan para favorecer el crecimiento, aislamiento e identificación de microorganismos. Los requisitos nutricionales de las bacterias reflejan su capacidad biosintética y ellas pueden obtener sus nutrientes para desarrollarse tomándolos directamente del medio o sintetizándolos a partir de otros materiales; además de los nutrientes, los medios de cultivo deben reunir condiciones físico - químicas específicas de actividad de agua, pH y potencial de óxido-reducción y, generalmente tienen condiciones de isotonía, aunque las bacterias son muy tolerantes a las variaciones de presión osmótica; existen inclusive, microorganismos osmofílicos y halofílicos que necesitan altas concentraciones de carbohidratos o sales para su crecimiento. El pH es muy importante para un buen desarrollo bacteriano, la mayoría de las bacterias crece a un pH cercano a la neutralidad, sin embargo hay microorganismos que requieren pH ácido o alcalino.

2.1.3. GENERALIDADES DE LOS MEDIOS DE CULTIVO

2.1.3. GENERALIDADES DE LOS MEDIOS DE CULTIVO

ANTECEDENTES DE LOS MEDIOS DE CULTIVO.

La primera noticia de medios de cultivo nos llega del micólogo Brefeld, que consiguió aislar y cultivar esporas de hongos en medios sólidos realizados a base de gelatina. Sin embargo este sistema no era adecuado para las bacterias (por su menor tamaño) y no fue hasta el año 1878 cuando Lister popularizó un método enfocado al cultivo puro basado en diluciones seriadas en un medio líquido.

Koch realizó sus investigaciones utilizando en un primer momento rodajas de patata como soporte nutritivo sólido, pero no tardó en recurrir al caldo de carne líquido, diseñado por Loeffler, al que, en 1881, añadió gelatina, logrando un medio sólido transparente ideal para la observación de la morfología macroscópica de las colonias microbianas. En el año 1882 tiene lugar uno de los grandes avances de la microbiología en relación con los medios de cultivo: el médico alemán Walter Hesse introduce el agar-agar (polisacárido extraído de algas rojas) como solidificante.

En 1887 un ayudante de Koch llamado Petri, comienza a utilizar placas de cristal planas, que se llaman desde entonces placas de Petri, para sustituir a las clásicas bandejas de vidrio cubiertas con campanas que se usaban hasta entonces. Beijerinck y Winogradsky, que desde de 1888 realizaron sus investigaciones sobre las bacterias quimioautótrofas (utilización de nitrógeno y azufre sobre todo) tuvieron gran importancia en el desarrollo de los medios selectivos y de enriquecimiento. Diseñaron este tipo de medios de tal forma que su especial composición química favorecía el crecimiento de ciertos tipos de microorganismos que, en función de sus procesos metabólicos, eran los únicos capaces de utilizar para su desarrollo ciertos nutrientes del medio.

En 1892 Würtz impulsó el uso de los medios diferenciales, incorporando indicadores de pH a la composición de ciertos medios con lo cual se podía observar la producción de ácidos en la fermentación en ciertos microorganismos

2.1.2.2. EQUIPO DE LABORATORIO

2.1.2.2. EQUIPO DE LABORATORIO

2.1.2.1. MATERIAL DE LABOARATORIO

2.1.2.1. MATERIAL DE LABOARATORIO

Materiales de uso en el laboratorio: plástico, vidrio, metal...

Nos encontramos en el laboratorio con distintos tipos de materiales: vidrio, plástico, porcelana... pero ninguno de ellos cumple las exigencias del laboratorio. Se tendrá que elegir en cada momento el material según el uso que le queramos dar, ningún utensilio es perfecto.

Vidrio: Se caracteriza porque tiene mucha resistencia química (frente a ácidos, frente a bases...), tiene mayor resistencia que el plástico, es muy estable, se caracteriza por su transparencia. Todos los vidrios no son perfectos para todas las técnicas, a veces se necesitan vidrios con resistencia técnica, con resistencia mecánica. Según el uso que le queramos dar aparecen vidrios especiales. La mayoría de los utilizados son vidrios boro silicatados, los cuales ofrecen gran resistencia térmica (vidrio pirex, quimax).Cuando se emplea el material de vidrio hay que tomar unas precauciones:

• No los podemos someter a cambios bruscos de temperatura (se provocan tensiones que pueden romper el cristal).
• Hay que colocar la estufa de secado o esterilización enfrío, ir calentándolo después, y cuando acaba el tiempo de secado dejar enfriar el material
• No se debe aplicar fuerza sobre llaves, tapones de vidrio
• No se debe someter a variaciones bruscas de presión
• No se debe conservar soluciones concentradas de bases en material de vidrio de borosilicato, porque son substancias muy cáusticas que pueden destruir la calibración del aparato.

Plástico: Los materiales de plástico pueden ser de uso múltiple, p ej. Las probetas, matraces, vasos de precipitados, las placas de petri...El plástico ofrece algunas ventajas frente al vidrio, es resistente a la rotura, tienen un peso bajo. Los utensilios de plástico de laboratorio son monómeros orgánicos polimerolarizadas. Hay gran variedad de plásticos, van a tener distintas propiedades físicas y químicas (por ejemplo, poliestireno, PVC, polipropileno...).Cuando se utiliza un plástico hay que tener en cuenta el tipo de plástico que se emplea porque algunos plásticos pueden ser atacados por disolventes orgánicos, por ácidos, por bases, además pocos plásticos pueden superar temperaturas altas.

Porcelana: Es el material que menos se usa en el laboratorio clínico, se utiliza cuando se necesitan materiales que resistan altas temperaturas, estos materiales suelen estar vidriados en el interior, para evitar que se adhieran partículas a su superficie, se utilizan sobre todo en el análisis gravimétrico

2.1.2. MATERIAL Y EQUIPO DE LABORATORIO

2.1.2. MATERIAL Y EQUIPO DE LABORATORIO

Como se puede apreciar en la definición de material, el término proviene del latín materialis, el cual hace referencia a aquello que se encuentra vinculado con la materia. Sin embargo, en su sentido amplio hace alusión a los elementos necesarios para llevar a cabo una determinada acción; es decir, los diversos componentes, ya sean reales o abstractos, que se reúnen en un grupo y que se emplean con fines específicos.

Es necesario aclarar que existen muchos tipos de materiales y que el significado del término puede variar levemente de acuerdo al punto de vista con el que se lo intente explicar. En este caso daremos la definición que se le da desde lainvestigación científica. En el ámbito de la investigación se emplea el concepto de material de laboratorio, para referirse a aquel que se emplea en distintos tipos de laboratorios y que se compone de diversos instrumentos que cumplen con funciones determinadas. Cabe definir previamente que un laboratorio es un espacio físico donde se desarrolla investigación en torno a un tema preciso para ampliar los conocimientos que en una determinada cienciase tiene sobre un fenómeno o tema particular.

En un laboratorio los materiales deben ser de buena calidad pues allí se realizarán investigaciones que, en muchos casos son de vital importancia para ampliar los conocimientos en un área específica de la ciencia; por ende, el lugar donde se sitúen debe ser apropiado, contar con una ventilación e iluminación adecuada y los instrumentos y materiales que hagan propicio el normal funcionamiento del lugar.

El material de laboratorio puede construirse con componentes muy variados, desde vidrio hasta madera pasando por goma, metal y plástico. Las características del material dependerán de su función, ya que la manipulación de ciertos productos implica riesgos. Entre las herramientas más habituales que se incluyen dentro del material de laboratorio, se encuentran los matraces (un recipiente con medidas), la pipeta, el tubo de ensayo, la probeta, el vaso de bohemia, el cristalizador, el embudo, el vaso de precipitados y el encendedor.

Clasificación del material de laboratorio

El material de laboratorio puede subdividirse en diversas clasificaciones de acuerdo a la función. De tal modo pueden ser: materiales para combinar sustancias, materiales para medir volúmenes o materiales para soportar a otrosinstrumentos. Aquellos materiales que sirven para combinar diferentes sustancias y exponerlas a cambios químicos deben estar construidos con componentes especiales y resistentes; es normal escucharlos nombres comerciales de Pyrex o Kimax al referirse a materiales de laboratorio, y es que son las más recomendados a nivel internacional si se desea montar un nuevo laboratorio. Entre estos materiales se encuentran el tubo de ensayo, la matraz de fondo plano y de Erlenmeyer el vaso de precipitados, entre otros.

Los materiales que se utilizan para medir volúmenes conforman el material volumétrico. Lo habitual es que estos componentes estén construidos con vidrio ya que favorecen la observación de aquello que alberga, pero también pueden ser de plástico transparente; en cualquiera de ambos casos están graduados. Entre estos materiales se encuentran la probeta, la pipeta, la bureta y el matraz aforado. Una alternativa dentro del material volumétrico, de todos modos, es elplástico sin color (transparente): es más barato y ayuda a evitar ciertas reacciones químicas que sí ocurren con el vidrio. Otro tipos de materiales son los utilizados para soporte y sujeción, que sirven para contener otros instrumentos que se utilicen en el laboratorio. Estos materiales son construidos en metal, a excepción de la gradilla que suele ser de madera o de plástico. Entre estos materiales se encuentran las pinzas para crisol, el tripié y triángulo de porcelana y la gradilla para tubos de ensayo. Existen otros materiales también utilizados en laboratorio, como la lámpara de alcohol, el embudo, el mortero con pistilo, la cucharilla de combustión, o la cuba hidroneumática, entre muchos más.